1、質(zhì)控菌株的確認(rèn)

  《中國藥典》四部1105和1108中采用金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌和黑曲霉這五株標(biāo)準(zhǔn)菌株對(duì)TSA進(jìn)行適用性檢查；《中國藥典》四部1106和1108中需用TSA對(duì)金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌和乙型副傷寒沙門菌進(jìn)行菌液制備；《中國藥典》四部1121中采用金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、白色念珠菌和黑曲霉這五株標(biāo)準(zhǔn)菌株對(duì)TSA進(jìn)行適用性檢查；因此驗(yàn)收TSA的質(zhì)控菌株可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的具體用途從相關(guān)通則中進(jìn)行選擇。

  值得注意的是，除了使用標(biāo)準(zhǔn)菌株驗(yàn)收TSA，還應(yīng)增加生產(chǎn)環(huán)境及產(chǎn)品中常見的污染菌株。雖然標(biāo)準(zhǔn)菌株涵蓋了自然環(huán)境中最為常見的微生物種類，包括革蘭氏陽性球菌和桿菌、革蘭氏陰性桿菌、產(chǎn)芽孢的桿菌以及真菌，但不能完全代表樣品中部分較為特殊的菌群。曾有學(xué)者考察過8個(gè)廠家TSA（對(duì)藥典要求的標(biāo)準(zhǔn)菌株均具有良好的促生長(zhǎng)能力）對(duì)人參土芽孢桿菌的促生長(zhǎng)能力(回收率)[1]，結(jié)果培養(yǎng)5天后，仍有3個(gè)廠家TSA不能達(dá)到50%的回收率。即人參土芽孢桿菌對(duì)TSA的質(zhì)量具有更好的篩選區(qū)分能力，該文章也建議將人參土芽孢桿菌作為質(zhì)控菌株進(jìn)行TSA的適用性試驗(yàn)，避免由于培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力不足而導(dǎo)致誤判的風(fēng)險(xiǎn)。

2、pH值監(jiān)控

  pH值是培養(yǎng)基的常規(guī)監(jiān)控項(xiàng)目，TSA的標(biāo)準(zhǔn)為滅菌后在25℃的pH值為7.3±0.2。

3、培養(yǎng)基性狀

培養(yǎng)基性狀也是驗(yàn)收TSA的關(guān)鍵項(xiàng)，直接影響能否順利完成試驗(yàn)以及結(jié)果的準(zhǔn)確性。

對(duì)于商品化的脫水培養(yǎng)基，首先要確認(rèn)干粉粉末是否均一，顏色是否發(fā)生變化，若為顆粒型培養(yǎng)基，需確認(rèn)其粒度及溶解性；其次要確認(rèn)滅菌后培養(yǎng)基外觀顏色是否正常、是否澄清無異物；制備好平板后，軟硬程度要適合涂布、劃線、倒置培養(yǎng)等基礎(chǔ)微生物操作；若采用傾注法，需確認(rèn)融化的TSA培養(yǎng)基在45~50℃的環(huán)境中放置8小時(shí)無凝固現(xiàn)象。

對(duì)于商品化的預(yù)制培養(yǎng)基，最重要的是培養(yǎng)基的無菌性檢查；其次要確認(rèn)外包裝完整無損，無過多水汽，平板顏色正常、無異物、無氣泡，倒置培養(yǎng)無掉板現(xiàn)象等。

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