實驗室自用培養(yǎng)基存放和商品化培養(yǎng)基儲藏需注意的問題
日期:2021-11-01 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽:1928 次
一、檢測實驗室自用培養(yǎng)基存放
在檢測實驗室中,偶爾制備的微生物培養(yǎng)基沒有用完,必須儲存再次使用,很多時候需預(yù)先制備更多培養(yǎng)基備用,常常會面臨半成品培養(yǎng)基的儲存情況。取決于半成品或成品培養(yǎng)基有效期的關(guān)鍵原因是光澤/穩(wěn)定/密封性。
⑴成份很簡單的純營養(yǎng)成分類培養(yǎng)基:這樣的中海培養(yǎng)基較為比較穩(wěn)定,一般而言室內(nèi)溫度可儲存數(shù)日或幾個星期,若密閉遮光冷凍冷藏儲存,一般而言可儲存幾個月。
注:固體培養(yǎng)基用前可水浴加熱或用微波爐加熱溶解,一般而言只可以溶解一回,頻繁的熱處理溶解會造成營養(yǎng)成分減少和瓊脂變的軟,如只含蛋白胨/氯化鈉/磷酸鹽等成份較為比較穩(wěn)定的中海培養(yǎng)基,營養(yǎng)肉湯/LB肉湯/緩沖蛋白胨水等。
⑵需添加不穩(wěn)定成份的不完全培養(yǎng)基:可將未添加不穩(wěn)定成份的基礎(chǔ)性培養(yǎng)基在室內(nèi)溫度(一般而言可儲存數(shù)日)或冷凍冷藏密閉(一般而言可儲存幾個星期或幾個月)儲存,臨用前再添加不穩(wěn)定成份制作而成完善培養(yǎng)基。若已添加不穩(wěn)定成份,應(yīng)在二至八攝氏度冷凍冷藏儲存,盡早使用,如添加卵黃的MYP/添加羊血的血瓊脂/添加抗生素的培養(yǎng)基等。注:一些液體培養(yǎng)基可以冷凍保存,溶解后不影響使用,但不可以冷凍包含瓊脂培養(yǎng)基,結(jié)冰會破壞瓊脂結(jié)構(gòu);固體培養(yǎng)基在使用前需加熱溶化后再加入不穩(wěn)定成分,加入不穩(wěn)定成分后不可再加熱。
⑶只能加熱滅菌或過濾除菌的培養(yǎng)基:此類培養(yǎng)基相對較不穩(wěn)定,建議現(xiàn)配現(xiàn)用,或二至八攝氏度冷藏保存數(shù)日,如XLD/亞硒酸鹽胱氨酸增菌液等,內(nèi)含不耐熱成分。
二、商品化成品培養(yǎng)基儲藏(脫水干燥培養(yǎng)基hndhjn.com即用型培養(yǎng)基)
(1)脫水干燥培養(yǎng)基儲存
①相對濕度:干粉培養(yǎng)基極具較強的吸濕性,于是必須在儲存的干燥的區(qū)域環(huán)境中,尤其是早已經(jīng)開啟的培養(yǎng)基,必須盡量避免在相對濕度低的區(qū)域環(huán)境中密閉儲存。如儲存環(huán)節(jié)中察覺培養(yǎng)基產(chǎn)生受潮結(jié)坨成塊/粘稠變色等狀況,則不可以使用。
注:部分培養(yǎng)基因干粉中添加了吐溫80,化學(xué)式為C24H44O?(C?H?O)?。(如MRS培養(yǎng)基)等液態(tài)成份,粉末稍有黏連或小團狀,能夠很簡單壓碎,未必是受潮造成,不會影響使用。
②環(huán)境溫度:多數(shù)商品化脫水培養(yǎng)基可常溫狀態(tài)儲存(一般而言指十至三十攝氏度)或陰涼處儲存(一般而言指不超過二十攝氏度),關(guān)于含不穩(wěn)定成份的培養(yǎng)基(如有些抗生素\顯色底物等),可在二至八攝氏度冷凍冷藏儲存。儲存環(huán)境溫度過高易造成有些不穩(wěn)定成份變性或降解。
③光照強度:中.海任何培養(yǎng)基都應(yīng)防止陽光照射,放置在陰暗處儲存,含對光比較敏感成份的培養(yǎng)基應(yīng)使用一定的遮光辦法儲存。
中海小結(jié):區(qū)域環(huán)境的相對濕度、環(huán)境溫度和光照強度是會影響培養(yǎng)基儲存有效期限的關(guān)鍵要素,未打開的商品化培養(yǎng)基應(yīng)遵循詳細說明放置在特定的環(huán)境下儲存,已打開的中 海培養(yǎng)基應(yīng)使用合適的密閉辦法,或盡量避免減少儲存區(qū)域環(huán)境的環(huán)境溫度與相對濕度,更能幫助培養(yǎng)基的儲存。
(2)即用型培養(yǎng)基儲存
⑴試管或液體瓶裝培養(yǎng)基/均質(zhì)袋等:商品化的即用型通常采取了有效的滅菌方式和密封保存,未開封前按說明保存即可;若已開封,應(yīng)做好有效措施防止污染,密閉保存,含不穩(wěn)定成分的應(yīng)冷藏保存。
注:一些含染料或酸堿指示劑的中'海培養(yǎng)基應(yīng)注意避光保存,如煌綠乳糖膽鹽/RV肉湯/乳糖蛋白胨等培養(yǎng)基,長時間見光易發(fā)生變色。
⑵瓊脂斜面/平皿等:大多數(shù)商品化的瓊脂培養(yǎng)基建議保存在二十攝氏度左右的環(huán)境中,含不穩(wěn)定成分的瓊脂培養(yǎng)基可置于五攝氏度左右的冷庫中保存。
①目前市場上大多數(shù)的平皿保存溫度都寫室溫或五至二十五攝氏度的一個很寬的保存范圍,但在實際保存過程中受水份蒸發(fā)和冷凝水的影響,建議保存在二十攝氏度左右效果更佳,溫度過低易出現(xiàn)冷凝水,溫度過高易導(dǎo)致中海生物培養(yǎng)基失水。
②不建議使用普通冰箱保存。冰箱的溫度相對不穩(wěn)定,制冷過程中 海溫度偏低易起霜/易導(dǎo)致培養(yǎng)基結(jié)冰,長期在冰箱中保存易導(dǎo)致瓊脂出現(xiàn)冰晶,結(jié)構(gòu)被將破壞。若要使用普通冰箱,建議將中.海生物培養(yǎng)基放置在遠離制冷或靠壁的位置,冷藏溫度盡量調(diào)高一些。
③拆封后的平皿不易久存,因為在非密閉環(huán)境中平皿易逐漸失水變薄。
⑶即用型生化管/鑒定條等:一些成分簡單的生化管(如蛋白胨水/嗜鹽性胰胨水等)可在室溫條件下存放較長時間,含酸堿指示劑的需要避光保存,在冷藏條件下可保存更長時間。
⑷試劑盒/染色液等:建議按照說明書保存,冷藏條件更穩(wěn)定。
中海生物總結(jié):低溫/避光/密封/工藝等決定即用型培養(yǎng)基的有效期長短關(guān)鍵外在因素。對于含不穩(wěn)定成分的培養(yǎng)基,低溫和避光是延長有效期的重要方法;對于包含瓊脂培養(yǎng)基,在冷藏時需注意不可使培養(yǎng)基結(jié)冰。
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