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USP-NF2021

通則 < 71 > 

2020年版《中國藥典（四部）》

通則1101

差異描述

1

如需儲存培養(yǎng)基，應(yīng)置無菌密閉容器中，在2～25 ℃環(huán)境下保存

制備好的培養(yǎng)基若不即時使用，應(yīng)置無菌密閉容器中，在2～25℃、避光環(huán)境下保存

《中國藥典》培養(yǎng)基儲存條件多了“避光”要求

2

“硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基”配制方法：將L -胱氨酸、瓊脂、氯化鈉、葡萄糖、酵母提取物和酪蛋白胰酶消化物與純化水混合，加熱至溶解。將硫乙醇酸鈉或硫乙醇酸溶解于上述溶

液，如必要，加入1N氫氧化鈉調(diào)滅菌后溶液pH為7.1±0.2，如需過濾，可再次加熱但不煮沸，趁熱用潤濕的濾紙過濾。加入刃天青鈉溶液，混合，分裝至適宜容器

“硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基”的配制方法：取除葡萄糖和刃天青溶液外的各成分混合，微溫溶解，調(diào)pH為弱堿性，煮沸，濾清，加入葡萄糖和刃天青溶液，搖勻，調(diào)滅菌后25℃的pH為7.1±0.2。分裝至適宜容器

二者的配制方法在各成分的添加順序、調(diào)pH的具體試劑及具體加熱時間等方面略有不同

2

硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基置30～35℃培養(yǎng)

除另有規(guī)定外，硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基置30～35℃培養(yǎng)。接種生物制品的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基的容器應(yīng)分成2等份，1份置30～35℃培養(yǎng)，1份置20～25℃培養(yǎng)

鑒于我國生物制品無菌檢查曾發(fā)現(xiàn)過個別品種在20～25℃培養(yǎng)的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中有菌生長的情況。《中國藥典》本著求同存異的整合原則，保留了生物制品該培養(yǎng)基分別置2個溫度范圍培養(yǎng)的規(guī)定

3

必要時，可使用“硫乙醇酸鹽替代培養(yǎng)基”代替“硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基”

無

《中國藥典》無“硫乙醇酸鹽替代培養(yǎng)基”

3

對于無法采用薄膜過濾法檢測的含防腐劑汞的供試品，如已按照需氧菌、厭氧菌和真菌促生長試驗所述方法進行了驗證，可使用硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基代替大豆酪蛋白消化物

培養(yǎng)基在20～25℃進行培養(yǎng)

無

《中國藥典》無該說明

4

“大豆酪蛋白消化物培養(yǎng)基”

“胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基”（TSBTrypticSoyaBroth）

雖名稱不同，但配方一致

4

“大豆酪蛋白消化物培養(yǎng)基”的配制方法：將配方中固體溶于純化水中，微溫溶解。將溶液冷卻至室溫，并用1N氫氧化鈉調(diào)滅菌后的pH為7.3±0.2

“胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基”的配制方法：取除葡萄糖外各成分，

混合，微溫溶解，濾過，調(diào)滅菌后25℃的pH為7.3±0.2，加

入葡萄糖，分裝，滅菌

二者配制方法略有不同，如各成分的添加順序及調(diào)節(jié)pH的具體試劑等

5

青霉素或頭孢菌素用培養(yǎng)基

《中國藥典》將具有抑菌性供試品所需培養(yǎng)基統(tǒng)一概述在“中和或滅活用培養(yǎng)基”

名稱不同

6

促生長試驗中，接種少量（不大于100cfu）的生孢梭菌、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌至適量硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基，每株菌均使用單獨的培養(yǎng)基。接種少量（不大于100 cfu）生孢梭菌至適量硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基替代品。接種少量（不大于100cfu）的黑曲霉、枯草芽孢桿菌和白色念珠菌至適量大豆酪蛋白消化物培養(yǎng)基，每株菌均使用單獨的培養(yǎng)基

靈敏度檢查，取適宜裝量的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基7支，分別接種不大于100cfu的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、生孢梭菌各2支，另1支不接種作為空白對照；取適宜裝量的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基7支，分別接種不大于100cfu的枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑曲霉各2支，另1支不接種作為空白對照

促生長試驗中，《美國藥典》包含了“硫乙醇酸鹽替代培養(yǎng)基”；

《中國藥典》則要求每種菌同時接種2支培養(yǎng)基，并另取1支作為空白對照

6

取部分培養(yǎng)基，培養(yǎng)14d，應(yīng)無菌生長

每批培養(yǎng)基一般隨機取不少于5支（瓶），置各培養(yǎng)基規(guī)定的

溫度培養(yǎng)14d，應(yīng)無菌生長

無菌性檢查中，《中國藥典》對于具體取樣數(shù)有明確規(guī)定

6

促生長試驗

靈敏度檢查

名稱不同，但試驗?zāi)康南嗤?，均為檢查培養(yǎng)基的靈敏度

7

菌株來自ATCC

菌株來自CMCC

國別不同，菌株來源不同

8

稀釋液和沖洗液有：1）液體A；2）用于青霉素類或頭孢菌素類的液體A；3）液體D；4）液體K

稀釋液和沖洗液有：1）0.1%無菌蛋白胨水溶液；2）pH7.0無菌氯化鈉- 蛋白胨緩沖液；3）其他經(jīng)驗證的適宜溶液（如0.9%無菌氯化鈉溶液）。如需要，可在上述液體中加入表面活性劑或中和劑等

除液體A即為0.1%無菌蛋白胨水溶液外，兩國藥典其他稀釋液和沖洗液均不同

9

方法適用性試驗用菌同促生長試驗

方法適用性試驗用菌將大腸埃希菌替代銅綠假單胞菌作為

試驗用菌

《中國藥典》中發(fā)現(xiàn)，銅綠假單胞菌對一些抗革蘭陰性桿菌為主的抗生素不敏感，故選擇更敏感的大腸埃希菌更符合方法適用性試驗的目的

10

供試品檢驗需包括陰性對照試驗

供試品檢驗需同時進行陽性對照試驗和陰性對照試驗

《中國藥典》無菌檢查法一貫強調(diào)應(yīng)同時進行供試品的陽性對照試驗

11

如供試品具有抑菌性，需用沖洗液沖洗濾膜不少于3次，沖洗液種類及用量同方法適用性試驗。每張濾膜均不得沖洗超過5次，每次100mL，即使方法適用性試驗表明該沖洗方法

不能完全清除供試品抑菌性，也不必增加沖洗次數(shù)

如供試品具有抑菌作用，須用沖洗液沖洗濾膜，沖洗次數(shù)一般不少于3次。每張濾膜每次沖洗量一般為100mL，總沖洗量一般不超過500mL，最高不得超過1000mL，以避免濾膜上

的微生物受損

《中國藥典》中要求應(yīng)盡可能通過沖洗消除抑菌活性，對于超過1000mL/膜仍不能完全消除抑菌作用的供試品，會采用中和、分膜等操作進一步消除

12

無菌氣霧劑產(chǎn)品

無菌氣霧劑供試品

《中國藥典》更詳細地描述了氣霧劑供試品取樣操作的具體方式和步驟

13

供試品接入量應(yīng)不超過培養(yǎng)基體積的10%

供試品接入量應(yīng)不超過培養(yǎng)基體積的10%。硫乙醇酸鹽流體

培養(yǎng)基裝量應(yīng)不低于15mL，胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基裝量應(yīng)不低于10 mL。一般樣品2種培養(yǎng)基接種的瓶或支數(shù)相等。

生物制品接種硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基和胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基的瓶數(shù)或支數(shù)為2∶1

《中國藥典》的要求可防止一些用太少的接種量和太少的培養(yǎng)基用量的操作，保證微生物有足夠的營養(yǎng)生長以及對試驗結(jié)果進行觀察和判斷

14

如果供試品使培養(yǎng)基渾濁，導(dǎo)致目視檢查不能確定是否存在微生物生長，則在培養(yǎng)開始14 d后，將部分培養(yǎng)基（每份不少于1mL）轉(zhuǎn)種至同種新鮮培養(yǎng)基中，將原始培養(yǎng)物和新接種的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)不少于4d

如在加入供試品后或在培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁，培養(yǎng)14d后，不能從外觀上判斷有無微生物生長，可取該培養(yǎng)液不少于1mL轉(zhuǎn)種至同種新鮮培養(yǎng)基中，將原始培養(yǎng)物和新接種的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)不少于4 d；或取培養(yǎng)液涂片，染色，鏡檢，判斷是否有菌

確認培養(yǎng)結(jié)果時，對于目視檢查不能確定是否存在微生物生長的情況，《美國藥典》僅提及了轉(zhuǎn)種的方式，《中國藥典》提及也可涂片檢測是否有菌