在使用微生物培養(yǎng)基過程中，發(fā)現(xiàn)一些技術(shù)人員對培養(yǎng)基使用存在偏差。中海生物技術(shù)zhzbio.com微生物培養(yǎng)基使用中常遇到的問題解答與大家分享和討論常見。

問題一：高壓滅菌是在培養(yǎng)基煮沸溶解后順序？ 

解答：以中海麥康凱瓊脂培養(yǎng)基為例：溶解滅菌后，盤子上無不溶性結(jié)晶紫、無紫色斑；與未溶解和消毒的盤子相比，盤子上有結(jié)晶紫和紫色斑點。因此正確的步驟順序是在高壓滅菌前需要進行培養(yǎng)基煮沸溶解。 

問題二：培養(yǎng)基pH值不在標準范圍內(nèi)的問題？

解答：出現(xiàn)此類情況有很多原因，中海生物大致分為①廠家質(zhì)量：出廠時pH不穩(wěn)定。②滅菌問題：是蒸壓過高或殺菌時間過長，導(dǎo)致葡萄糖焦化，因此，pH值降低。③存放周期：保存時間超過保質(zhì)期或結(jié)塊水的質(zhì)量有問題。④水質(zhì)問題：采用去離子水/蒸餾水/純凈水等，不要采用礦泉水和自來水。⑤存儲溫度：儲存溫度過高。⑥光線直射等六種原因，可逐一檢查排除解決問題。

問題三：如何測定培養(yǎng)基的pH值？

解答：中'海對于不需要高壓滅菌的培養(yǎng)基，先煮沸溶解后冷卻至二十五度，確定pH值；對需要高壓滅菌的介質(zhì)取平均值，高壓滅菌后冷卻至二十五度，這兩種狀況測量培養(yǎng)基pH值，固體培養(yǎng)基至少檢測兩個點，取它們的平均值。

問題四：高壓滅菌造成培養(yǎng)基結(jié)焦焦化問題？

解答：在實驗過程中，檢測人員發(fā)現(xiàn)在高壓滅菌后的培養(yǎng)基有結(jié)焦焦化現(xiàn)象。中海微生物認為造成這種現(xiàn)象是：控制培養(yǎng)基在容器中不要超過百分之八十，避免填充過多。注意控制高壓滅菌時間過長（115-116度）二十分鐘即可，溫度不超過121度，而且滅菌后的培養(yǎng)基在高溫環(huán)境中不要長時間存放。以上原因都會導(dǎo)致培養(yǎng)基結(jié)焦焦化。

問題五：含瓊脂的培養(yǎng)基有時在平板上不凝固或凝固不好問題？

解答：在此種情況下，中海生物技術(shù)建議：對于需要高壓滅菌的培養(yǎng)基, 倒入平板前先搖一搖。主要是瓊脂培養(yǎng)基的分子量比較大，在冷卻過程中容易沉淀到底，造成瓊脂不能均勻分布。對于無需高壓滅菌的培養(yǎng)基，不能直接煮沸溶解后倒入平板、需要重復(fù)三至五次煮沸溶解過程，因一次無法保證瓊脂完全溶解。

問題六：同一品牌不同批號的粉末顏色不一樣問題？

解答：中.海分析可能有：微生物培養(yǎng)基成分中含有染料或指示劑；不同批次的粉狀培養(yǎng)基含水量不同。一般要求≤6。含水量越高，顏色越深；研磨時間越長，顏色越深等三個原因。

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