第一種方法：常規(guī)微生物菌株貯存

此方法操作非常簡單，直接貯藏在普通冰箱中，并且可以在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中使用。此法缺點(diǎn)是微生物菌株保留時間短、傳代頻繁，并且菌株易于突變。  

第二種方法：半固體穿刺貯存

通過穿刺接種法把中海細(xì)菌培養(yǎng)物接種到半固體培養(yǎng)基中，在二十四小時培養(yǎng)后，加一層無菌液體石蠟，厚度約壹厘米，并保存在冰箱中。腸桿菌和葡萄球菌等，通?？梢员４嫒齻€月至半年時間。當(dāng)需要繼代培養(yǎng)和移植時，傾斜半固體應(yīng)變管以使液體石蠟流到一側(cè)，然后將細(xì)菌轉(zhuǎn)移到中海培養(yǎng)基zhzbio.com中。將少量液體石蠟放在高濃度醫(yī)用消毒酒精中的接種環(huán)上，然后進(jìn)行燃燒消毒，以避免直接在酒精燈上燃燒，液體石蠟會濺到周圍并造成污染。如果保存副溶血弧菌，則可以添加氯化鈉制成3.5高鹽半固體，在室溫下它可以保存壹個月。  

第三種方法：沙管貯存 

適用于產(chǎn)生孢子的細(xì)菌，將篩分的中性細(xì)沙干燥，放入約一厘米高的小試管中，用棉塞塞好，然后消毒并干燥以后使用。用無菌生理鹽水洗滌掉中.海生物培養(yǎng)基上的細(xì)菌培養(yǎng)物以使細(xì)菌懸浮。然后吸取約半毫升的這種細(xì)菌懸浮液，并將其倒入砂管中，以使沙子完全潤濕。塞上棉塞，放入干燥器中瀝干水分。然后將其置于氯化鈣吸收干燥劑瓶并保留在冰箱中以備后用。使用時可以在適合的培養(yǎng)基上接種沙子接種環(huán)。    

第四種方法：斜面貯存 

普通瓊脂斜面貯存方法：普通瓊脂斜面可接種葡萄球菌，腸桿菌和其他不需要高營養(yǎng)的細(xì)菌，底部應(yīng)加入少量無糖肉醬防止干燥，但應(yīng)將Proteus OX和傷寒bar O菌株接種在干燥的瓊脂斜坡上，以防止突變。將其用橡膠塞塞緊，在經(jīng)過孵育后，將其存儲在冰箱中，該冰箱通?？梢源鎯A存菌株三個月或半年。 

血液瓊脂斜面貯存方法：鏈球菌和血瓊脂斜面上應(yīng)接種肺炎球菌和其他營養(yǎng)要求高的細(xì)菌。經(jīng)過培養(yǎng)和生長，請存放在冰箱中。鏈球菌必須每15-30天移植壹次，肺炎球菌必須每四天移植一次。 在傾斜的浸入液中加入無菌液體石蠟，然后超過約壹厘米，存放在冰箱中。此方法用于存儲含有Vi抗原的沙門氏菌，而其他含有表面抗原的細(xì)菌則可以存儲90-180天。

呂氏血清斜面：白喉棒狀桿菌可以存儲在這種中 海培養(yǎng)基上，其成分為1份pH7.4的葡萄糖肉湯，三份無菌牛血清或兔血清。白喉棒狀桿菌在這種培養(yǎng)基上快速生長旺盛，并且細(xì)菌的形態(tài)是典型的。如果將5~10%中性甘油添加到中'海培養(yǎng)基中，則培養(yǎng)的白喉棒狀桿菌異色顆粒將更加明顯，并且它們將在一天后老化并變成多態(tài)性，幾乎沒有差異。染色后的顆粒，細(xì)菌體大三四倍，放在冰箱中可以保存14-30天。

第五種方法：冷凍貯存 

中海實(shí)驗(yàn)室必須配備低濃度的溫度低于零下二十度的冰箱，中海生物技術(shù)人員提示：冰箱的溫度越低，保存時間就越長。  

第六種方法：濾紙片超低溫貯存菌種 

切開新華濾紙放入3毫米x 3毫米的容器中，對其進(jìn)行高壓滅菌，然后將其放入裝有蓋的半毫升無菌塑料離心管中，以供使用。分離并純化要保留在血板上的細(xì)菌后，使用無菌鑷子夾住濾紙，將大量細(xì)菌刮在板上，然后將其放入塑料離心管中，然后可以將一根離心管放進(jìn)去。幾十張帶有細(xì)菌的濾紙，然后蓋上蓋子，用膠帶將蓋子密封好，并注明患者的姓名，細(xì)菌名稱和保存日期。將塑料管放入零下七十度冰箱中。使用時，從塑料離心管中取出一個細(xì)菌，將其放入富集肉湯中，孵育十八至二十四小時，然后將細(xì)菌懸浮液轉(zhuǎn)移至血平板中。此方法適合于保存不需要高營養(yǎng)的細(xì)菌，但不適合保存更為嚴(yán)格的微生物菌種。  

第七種方法：商品化的微生物菌株貯存管 

每個保藏管包含二十至二十五個珠子和緩沖液。使用時，將菌落放入緩沖液中，混合，吸取緩沖液，然后將其在零下十度冰箱中保存十年，然后可以在零下二十度冰箱中保存一至三年?；謴?fù)時只需要將珠子放入肉湯中或在板上滾動即可。商業(yè)菌株保存管操作簡單，但價格昂貴。中海生物期望隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展及實(shí)驗(yàn)室條件的不斷發(fā)展和完善，將有更好的生產(chǎn)設(shè)備使用。  

第八種方法：菌株的細(xì)菌識別卡貯存 

此方法適用于使用VITEK自動微生物識別儀的實(shí)驗(yàn)室。方法是直接在識別卡上標(biāo)記識別卡并將其存儲在零下二十度冰箱中。進(jìn)行復(fù)蘇時，將識別卡直接從零下二十上升至零上三十五度，并等待直至小孔液體完全融化。使用注射器按照無菌步驟將陽性生長孔中的液體吸出，將其放在合適的板上，然后將其放在培養(yǎng)箱中放置一至兩天。該方法的生化卡中的細(xì)菌被反復(fù)冷凍和融化五次并分離產(chǎn)生的細(xì)菌是相同的。金黃色葡萄球菌，腸桿菌和念珠菌的生存時間不少于兩年半;腸球菌，黃桿菌和不動桿菌的生存時間不少于一年半，鏈球菌和假細(xì)菌的生存時間，莫納斯的生存時間不少于十個月。

第九種方法：濕牛奶冷凍貯存

原料保護(hù)性牛奶的制備：將鮮牛奶反復(fù)通過吸收性棉過濾三次，用十磅的高壓釜滅菌十分鐘，并保存在冰箱中以備后用。關(guān)于菌種管的處理：首先在清潔溶液中浸泡一天，然后用清水沖洗，然后在蒸餾水中浸泡過夜以達(dá)到中性，然后用棉塞塞住噴嘴，并高壓滅菌十五磅壓力，持續(xù)半小時以供使用。方法將各種細(xì)菌種植在生長良好的平板培養(yǎng)基上，純化后，將它們在培養(yǎng)箱中孵育十八小時，然后用制備的保護(hù)性牛奶清洗苔蘚，然后用無菌毛細(xì)管滴管吸取細(xì)菌懸液。將液體倒入菌株的球莖中，每個球莖中大約一半的細(xì)菌，然后火焰密封，并保存在零下二十度冰箱中。抵抗力強(qiáng)的細(xì)菌可以保存至少36個月，抵抗力弱的細(xì)菌可以保存不少于24個月。

第十種方法：冷凍真空干燥貯存 

這種方法是最好的方法目前用于保存菌株。其優(yōu)勢特點(diǎn)是應(yīng)用廣泛性。除了一些不產(chǎn)生孢子而僅產(chǎn)生菌絲體的絲狀真菌外，不適合該方法貯存，其他主要類型的微生物如細(xì)菌/放線菌/酵母/絲狀真菌和病毒也可以通過該方法貯存。有著保存期長，成活率高的特點(diǎn)。實(shí)際應(yīng)用中，在真空冷凍干燥的安培管中保存的真菌的生存期長達(dá)四十年，通常微生物菌種可以保存不少于十年。在保存期間，微生物菌種貯存可以避免被其他細(xì)菌污染；它易于攜帶和運(yùn)輸，并且易于實(shí)現(xiàn)商業(yè)化生產(chǎn)。其缺點(diǎn)是需要某些設(shè)備，冷凍真空干燥器以及繁瑣的操作。傳統(tǒng)上使用過濾管將玻璃過濾管改為帶蓋的半毫升塑料離心管。將塑料離心管放入耐高壓塑料離心管盒中，用雙層報(bào)紙包好，用高壓蒸汽滅菌十五磅十五分鐘，然后放入烤箱干燥八十分鐘。在凈化工作臺中，將用脫脂奶洗過的濃稠細(xì)菌懸浮液添加到帶有長毛細(xì)管玻璃滴管的塑料離心管底部，每次約五分之一毫升，切記不要用離心機(jī)污染離心管口。牛奶用添加的細(xì)菌液體離心，將試管箱在零下二十度的冰箱中預(yù)冷凍。預(yù)冷凍后，將離心管箱放入冷凍干燥機(jī)的干燥箱中進(jìn)行冷凍干燥。冷凍干燥后，在不抽真空的情況下將離心管蓋壓入純化工作臺。標(biāo)簽和密封用膜密封離心管的嘴并存放在零下二十度冰箱中。

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