培養(yǎng)基定義 ： 

    培養(yǎng)基含有維持可培養(yǎng)微生物所需的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)；除此之外，培養(yǎng)基中還添加了許多不同的成分，從而使培養(yǎng)基可以選擇培養(yǎng)或不培養(yǎng)某些微生物。培養(yǎng)基按物理狀態(tài)可細(xì)分為：

    a.液體培養(yǎng)基，通常被稱為“肉湯”。

    b.固體和半固體培養(yǎng)基，這類培養(yǎng)基含有凝固劑，可以是瓊脂或明膠或一些其他類似物質(zhì)。這類培養(yǎng)基被通稱為“瓊脂”，與所使用的固化劑的類型無(wú)關(guān)。

    “瓊脂”是源自海藻的凝膠狀物質(zhì)。膠凝劑是從一些紅藻物種的細(xì)胞壁獲得的無(wú)支鏈多糖，主要來(lái)自石花菜屬Gelidium和江蘺屬Gelidium，或其他藻類如Sphaerococcus euchema。

    根據(jù)用途培養(yǎng)基可劃分為：

    a.生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

    b.運(yùn)輸培養(yǎng)基。

    c.保藏培養(yǎng)基。

    d.復(fù)蘇培養(yǎng)基

    e.增菌培養(yǎng)基。

    f.選擇性培養(yǎng)基。

    g.鑒別培養(yǎng)基。

    這些培養(yǎng)基的細(xì)分雖然很常見(jiàn)，也有些隨意。同時(shí)前文列出的部分培養(yǎng)基可能具有多種用途。

培養(yǎng)基的供應(yīng)：

就培養(yǎng)基如何達(dá)到使用點(diǎn)而言，培養(yǎng)基可以按下面分類：

    a.即用型預(yù)制培養(yǎng)基（供應(yīng)商）

    儲(chǔ)存于容器中的即用型培養(yǎng)基，比如平皿培養(yǎng)基，試管培養(yǎng)基，液體瓶裝培養(yǎng)基等其他包裝型式。

    b.非即用型預(yù)制培養(yǎng)基

    該培養(yǎng)基需要在使用前進(jìn)行至少一步的操作如融化、倒平皿、添加活性成分等，以達(dá)到預(yù)期使用目的。

    c.脫水配方培養(yǎng)基

    需要使用者在特定區(qū)域根據(jù)脫水配方培養(yǎng)基標(biāo)簽描述的一致操作，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)基配制、滅菌等操作制成目標(biāo)培養(yǎng)基。

    培養(yǎng)基的制備需要一致的做法和專門的制備區(qū)域。

除培養(yǎng)基外，稀釋劑和沖洗溶液廣泛應(yīng)用于微生物檢測(cè)。稀釋劑是無(wú)菌溶液，通常是等滲平衡的，旨在促進(jìn)微生物的回收或從表面清除微生物

    根據(jù)上述接收培養(yǎng)基的方式，培養(yǎng)基通常來(lái)源于兩個(gè)來(lái)源：現(xiàn)場(chǎng)制備或者更多地由供應(yīng)商制備。無(wú)論來(lái)源如何，微生物學(xué)家必須確認(rèn)供應(yīng)商具有生產(chǎn)一致和高質(zhì)量培養(yǎng)基的能力。供應(yīng)商將進(jìn)行支撐培養(yǎng)基質(zhì)量控制的大部分化學(xué)試驗(yàn)，如pH值、凝膠強(qiáng)度、澄清度和顏色。微生物學(xué)家通過(guò)內(nèi)部或外部的質(zhì)量審核，以及培養(yǎng)基在不同批次和不同時(shí)期的實(shí)際表現(xiàn)來(lái)確認(rèn)可靠性(Mossel et al., 1980)。

用于生物污染控制的培養(yǎng)基類型：

 兩種常見(jiàn)的普通培養(yǎng)基類型是營(yíng)養(yǎng)瓊脂（NA）或肉湯（NB）；以及胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)或肉湯(TSB)（如Pflug、Smith和Christensen（1981）等早期作者所述）。特別是TSA廣泛用于環(huán)境監(jiān)測(cè)。胰蛋白胨大豆培養(yǎng)基和營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基均為未定義營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基，因?yàn)檫@其中的氨基酸來(lái)源含有多種化合物，確切組成未知。這些培養(yǎng)基含有大多數(shù)細(xì)菌生長(zhǎng)所需的基本成分，并且是非選擇性的，因此可用于一般的分離、培養(yǎng)和復(fù)蘇細(xì)菌。

    環(huán)境監(jiān)測(cè)用培養(yǎng)基主要是通用培養(yǎng)基：TSA、血平板或營(yíng)養(yǎng)瓊脂輔以真菌平板（以獨(dú)立評(píng)估細(xì)菌和真菌），或使用通用培養(yǎng)基同時(shí)檢測(cè)兩者。

    中國(guó)藥典2020版“9205 藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室微生物監(jiān)測(cè)和控制指導(dǎo)原則”描述：

“環(huán)境浮游菌、沉降菌及表面微生物監(jiān)測(cè)用培養(yǎng)基一般采用胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（TSA），培養(yǎng)溫度為30～35℃[1]，時(shí)間為3～5天，必要時(shí)可加入適宜的中和劑。當(dāng)監(jiān)測(cè)結(jié)果有疑似真菌或考慮季節(jié)因素影響時(shí)，可增加沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（SDA），培養(yǎng)溫度為20～25℃，時(shí)間為5～7天。如需要，應(yīng)根據(jù)環(huán)境污染微生物種群特性選擇特定的培養(yǎng)條件和培養(yǎng)時(shí)間。”

TSA：

TSA是一種用于分離和培養(yǎng)非苛養(yǎng)和苛養(yǎng)菌的培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基用于環(huán)境監(jiān)測(cè)和加工過(guò)程中生物負(fù)載檢測(cè)。當(dāng)用于環(huán)境監(jiān)測(cè)時(shí)，培養(yǎng)基中可能含有中和劑，以便可以中和消毒劑殘留物。這種培養(yǎng)基的某些樣本在生產(chǎn)設(shè)施中使用時(shí)，還會(huì)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行輻照。

配方在表1中。

    該培養(yǎng)基含有酪蛋白和豆粕的酶解物，可提供氨基酸和其他含氮物質(zhì)，使其成為多種生物體的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基，葡萄糖提供能量來(lái)源，氯化鈉則用于維持滲透壓平衡。

    磷酸鹽充當(dāng)緩沖劑以維持pH（Abbott & Graham，1961），加入瓊脂以形成凝膠。在促生長(zhǎng)試驗(yàn)中，美國(guó)藥典常見(jiàn)的試驗(yàn)微生物如下：

·枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis（ATCC 6633）

·白色念珠菌Candida albicans（ATCC 10231）

·巴西曲霉Aspergillus brasiliensis（ATCC 16404）

·金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus（ATCC 6538）

·銅綠假單胞菌Pseudomonas aeruginosa（ATCC 9027）

    針對(duì)TSA/TSB，中國(guó)藥典1105里常見(jiàn)的適應(yīng)性試驗(yàn)菌株如下：

·金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus （CMCC(B)26 003）

·銅綠假單胞菌Pseudomonas aeruginosa （CCMCC(B)10 104）

·枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis（CCMCC(B)63 501）

·白色念珠菌Candida albicans（CMCC(F)98 001）

·黑曲霉Aspergillus niger（CMCC(F )98 003）

    使用這些生物體可確保測(cè)試符合藥典中描述培養(yǎng)基用途的不同章節(jié)的要求。后續(xù)文章介紹了該培養(yǎng)基的一些一般應(yīng)用。

營(yíng)養(yǎng)瓊脂：

 NA是一種用于培養(yǎng)非苛養(yǎng)微生物的通用培養(yǎng)基。這是一種通用生長(zhǎng)培養(yǎng)基，主要用于保存微生物培養(yǎng)物。自大約1910年以來(lái)，已經(jīng)開(kāi)發(fā)了多種配方。表2中給出了典型的配方。

    配方中的動(dòng)物組織消化液、牛肉提取物和酵母提取物可提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需的氮化合物、碳、維生素和一些微量成分。氯化鈉可維持培養(yǎng)基的滲透平衡。

    營(yíng)養(yǎng)瓊脂是證明用途的理想選擇，因?yàn)樵谧C明用途中，培養(yǎng)物通常需要在環(huán)境溫度下存活更長(zhǎng)的時(shí)間，而不會(huì)像營(yíng)養(yǎng)更豐富的培養(yǎng)基那樣出現(xiàn)過(guò)度生長(zhǎng)的風(fēng)險(xiǎn)。未經(jīng)改良的培養(yǎng)基，用于培養(yǎng)和計(jì)數(shù)非苛養(yǎng)的細(xì)菌。加入不同的生物液體，如馬血或羊血、血清、蛋黃等，可使培養(yǎng)基適用于培養(yǎng)相關(guān)的苛養(yǎng)細(xì)菌 (Lapage, Shelton, &Mitchell, 1970)。

美國(guó)藥典中用于測(cè)試培養(yǎng)基的合適生物體包括：

·大腸桿菌Escherichia coli（ATCC 25922）

·銅綠假單胞菌Pseudomonas aeruginosa（ATCC 27853）

·傷寒沙門氏菌Salmonella Typhi（ATCC 6539）

·金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus（ATCC 25923）

·釀膿鏈球菌Streptococcus pyogenes（ATCC 19615）

沙氏葡萄糖瓊脂：

沙氏葡萄糖瓊脂（SDA）（相當(dāng)于沙氏葡萄糖瓊脂）用于分離和培養(yǎng)真菌，尤其是皮膚真菌。配方已經(jīng)經(jīng)過(guò)改良。Chester W。Emmons對(duì)配方進(jìn)行了調(diào)整，使pH值更接近中性范圍，并降低了葡萄糖濃度，以支持其他微生物的生長(zhǎng)。配方示與表3中。

    配方中的真菌蛋白胨可提供含氮化合物，葡萄糖提供能量來(lái)源，高濃度葡萄糖和低pH值有利于真菌生長(zhǎng)，抑制測(cè)試樣本中的污染細(xì)菌。

美國(guó)藥典中用于檢測(cè)該培養(yǎng)基的微生物包括[KM1] ：

    ·白色念珠菌Candida albicans（ATCC 1023）

    ·巴西曲霉Aspergillus brasiliensis(ATCC 16404)

中國(guó)藥典（1105）中用于該培養(yǎng)基的適應(yīng)性試驗(yàn)微生物包括[KM2] ：

    ·白色念珠菌Candida albicans（CMCC(F)98 001）

    ·黑曲霉Aspergillus niger（CMCC(F )98 003）

    在外觀方面，當(dāng)在皮氏培養(yǎng)皿中時(shí)，培養(yǎng)基呈現(xiàn)淺琥珀色，澄清至輕微乳白色的凝膠狀。另一種瓊脂是麥芽提取物瓊脂，它含有麥芽提取物、葡萄糖和真菌蛋白胨；此外，還可以選擇其他瓊脂來(lái)培養(yǎng)真菌，例如孟加拉紅培養(yǎng)基或馬鈴薯葡萄糖瓊脂。盡管存在其他類型的真菌培養(yǎng)基，SDA更常見(jiàn)。

血平板：

血平板，如哥倫比亞血平板，是一種高營(yíng)養(yǎng)的通用瓊脂。血平板是一種通用的增菌培養(yǎng)基，常用于培養(yǎng)苛養(yǎng)菌，并根據(jù)其溶血特性區(qū)分細(xì)菌，該培養(yǎng)基用于某些微生物鑒定試驗(yàn)。

    在所描述的瓊脂中，TSA單獨(dú)使用或與SDA聯(lián)合使用是最常見(jiàn)的。營(yíng)養(yǎng)瓊脂是一種最有效用于培養(yǎng)微生物的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基，支持多種非苛養(yǎng)菌的生長(zhǎng)，在臨床實(shí)踐中，血平板最適合用于培養(yǎng)與人類有關(guān)的生物。

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