馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基PDA的配制方法
日期:2023-12-01 | 中海生物技術(shù)文庫(kù) | 瀏覽:674 次
PDA培養(yǎng)基是馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的簡(jiǎn)稱, 即Potato Dextrose Agar(Medium) , 分別對(duì)應(yīng)馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂的英文。它屬于固體培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基。PDA培養(yǎng)基宜于微生物生長(zhǎng)發(fā)育、節(jié)省原料等優(yōu)勢(shì), 一般在培養(yǎng)酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面應(yīng)用廣泛。
(1)稱量和熬煮
按培養(yǎng)基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱至沸騰, 維持20-30min, 用可用2層紗布趁熱在量杯上過(guò)濾,濾渣棄取。濾液補(bǔ)充水分到1000ml。
(2)加熱溶解
把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉網(wǎng)上,小火加熱,并用玻棒不斷攪拌,以防瓊脂糊底或溢出,待瓊脂完全溶解后,再補(bǔ)充水分至所需量。
(3)分裝
按實(shí)訓(xùn)要求,將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶?jī)?nèi)。分裝時(shí)可用三角漏斗以免使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上造成污染。分裝量:固體培養(yǎng)基約為試管高度的1/5,滅菌后制成斜面,分裝入三角瓶?jī)?nèi)以不超過(guò)其容積的一半為宜;半固體培養(yǎng)基以試管高度的1/3為宜,滅菌后垂直待凝。
(4)加棉塞
培養(yǎng)基分裝完畢后,在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等),以阻止外界微生物進(jìn)入培養(yǎng)基內(nèi)造成污染,并保證有良好的通氣性能。
(5)包扎
加塞后,將全部試管用麻繩或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一層牛皮紙,以防加塞后,將全部試管用麻繩或橡皮止滅菌時(shí)冷凝水潤(rùn)濕棉塞,其外再用基名稱、組別、配制日期。
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