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    伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基EMB原理配方用途方法

    日期:2022-04-07 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:1991 次

    ㈠伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基原理:

    伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基算是弱選擇性培養(yǎng)基,英文簡稱EMB培養(yǎng)基,通常用于分離鑒別腸道致病菌,尤其是大腸菌群和糞大腸菌群。蛋白胨供應碳源\氮源\維生素\生長因子等營養(yǎng)物質(zhì);乳糖是由大腸桿菌發(fā)酵的碳水化合物;磷酸氫二鉀是培養(yǎng)基pH緩沖劑;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;伊紅又稱曙紅或四溴熒光素,為酸性染料,美藍又稱亞甲藍,為堿性染料。它們都被用作培養(yǎng)基中的鑒別指示劑,以抑制革蘭氏陽性菌的生長。

    大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸時,細菌帶正電,因此被染成紅色,再與美藍結(jié)合,產(chǎn)生紫黑色菌落,有金屬光澤;產(chǎn)氣腸桿菌呈褐色,幾乎沒有金屬光澤。乳糖分解菌/沙門氏菌和志賀氏菌為乳糖發(fā)酵微生物,產(chǎn)生無色/透明或琥珀色菌落;凝固酶陽性葡萄球菌是具有無色針尖的菌落;白色念珠菌是蜘蛛絲或羽毛菌落。不致病/乳酸不發(fā)酵的革蘭氏陰性菌也會在培養(yǎng)基上生長,需要通過其他的生化試驗來分辨。

     

    ㈡伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基EMB配方:

    成分(g/L)

    蛋白胨:10.0 

    瓊脂粉:14.0 

    氯化鈉:5.0

    伊紅:0.4     

     乳糖:10.0

     美藍:0.065

    牛肉浸出粉:3.0

    溫度:25℃ PH值:7.0~7.4

     

    ㈢伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基用途方法:

    稱取中海伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基干粉37.4g克,添加1.0升蒸餾水或去離子水,攪拌加熱煮沸至完全溶解,在一百二十一度高壓滅菌十五分鐘后備用。

    使用中海生物伊紅美藍培養(yǎng)基鑒定水中大腸桿菌,具體操作流程如下所述:

    ⒈制作伊紅美藍培養(yǎng)基,趁熱注入培養(yǎng)皿,濃縮成平板備用。

    ⒉取河水或溝水于高溫滅菌錐形瓶中,以1比10稀釋。

    ⒊在伊紅美藍培養(yǎng)基上接種0.1毫升稀釋液。用劃線平板法分離。

    ⒋將劃線培養(yǎng)皿倒置,三十七度放置十八至二十四小時。培養(yǎng)基中會出現(xiàn)大腸桿菌菌落,深藍色黑色點有金屬光澤或無光澤。

    ⒌將菌落接種在斜面培養(yǎng)基上,由營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基制作而成。

     

    伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基(EMB)

     

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