瓊脂(Agar)是一類從植物中提取的多糖，主要是源自于海藻植物。在微生物培養(yǎng)基中，瓊脂通常只用作凝固劑。液體培養(yǎng)基中瓊脂的用量通常為0.5~2g/L，使培養(yǎng)基擁有相應(yīng)的粘性，避免液體對(duì)流。它經(jīng)常使用于厭氧培養(yǎng)。半固體培養(yǎng)基瓊脂用量通常為3.5~4g/L，經(jīng)常使用于菌種保藏、動(dòng)態(tài)試驗(yàn)等。植物組織培養(yǎng)基中瓊脂的用量通常為5~10g/L，固體培養(yǎng)基中瓊脂的用量通常為5~10g/L。通常瓊脂粉為白色、淺黃色或淺灰色粉末，不溶解于冷水。大多數(shù)瓊脂的熔點(diǎn)在90℃左右，冷卻后大多數(shù)瓊脂的冰點(diǎn)在40℃左右。反復(fù)加熱冷卻可以使瓊脂多次由液態(tài)變?yōu)楣虘B(tài)，但瓊脂的凝膠強(qiáng)度會(huì)愈來愈低。

一、瓊脂培養(yǎng)基制備使用

①依據(jù)瓊脂培養(yǎng)基的產(chǎn)品標(biāo)簽，稱取適量培養(yǎng)基干粉，溶解于純凈水中，加熱煮沸至瓊脂完全溶解，分裝于試管或錐形瓶中；

②在規(guī)定的條件下對(duì)包裝好的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。加熱滅菌后的培養(yǎng)基可反復(fù)煮沸4~6次，一直到中海培養(yǎng)基完全溶解，然后倒入平板中待用；

③滅菌后，待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)，可放至47~50℃的水浴中保溫。水浴溫度可依據(jù)中海生物瓊脂培養(yǎng)基實(shí)際凝固溫度適當(dāng)提高，存放時(shí)間通常不超過四個(gè)鐘頭；

④使用前，加入相應(yīng)的添加劑成分，搖勻，倒入平板中，凝固后備用；或制成斜面，投入使用等。

二、瓊脂培養(yǎng)基注意要點(diǎn)

①溶解干粉時(shí)，提議水溫在40℃以下，不超過60℃。瓊脂遇到熱水，表面容易吸水變硬，不利于分散和溶解。所以干粉溶解時(shí)，宜用冷水并不斷攪拌，一直到分散均勻無結(jié)塊，后再加熱。

②滅菌前，須要將瓊脂加熱煮沸，使其完全溶解分散均勻后，方能進(jìn)行試管或錐形瓶分裝，不然分裝后瓊脂可能分布不均、凝結(jié)；

③滅菌前加熱煮沸溶解還有助于加快高壓滅菌過程中的熱量滲透，提高滅菌效果，降低滅菌失敗的概率。

④凝固的培養(yǎng)基不能重新高溫高壓滅菌。倘若中 海培養(yǎng)基中的成分穩(wěn)定，可以在沸水浴中重新溶解以供一次使用。

⑤須要添加抗生素或其他不穩(wěn)定成分的培養(yǎng)基應(yīng)在使用前添加，當(dāng)培養(yǎng)基冷卻至50~55℃時(shí)添加。過早或過燙加入這些成分，容易導(dǎo)致不穩(wěn)定成分分解，降低培養(yǎng)基的使用效果；

⑥固化后的培養(yǎng)基不能反復(fù)加熱融化使用。反復(fù)加熱容易分解培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)，瓊脂的凝膠強(qiáng)度下降。通常允許成分穩(wěn)定的培養(yǎng)基溶解一次使用。

⑦固化的培養(yǎng)基不宜儲(chǔ)存在冷凍條件下。中海培養(yǎng)基冷凍會(huì)破壞瓊脂的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，造成瓊脂變性，水分流失或凝結(jié)不良。

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